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內分泌物在膠束中的增溶作用——材料和方法
來源:Kibron 瀏覽 1036 次 發布時間:2020-09-22
材料
陽離子表面活性劑 HTAB(純度 > 98.0%)購自 Tokyo Kasei(日本)。 NP(技術級)、hp-β-CD(平均分子量約為 1,540 g mol-1)和羅丹明 B(純度約為 95%)購自 Sigma-Aldrich。 β-E2(>99% 純度)購自 Alfa Aesar。 碘化鈉(NaI,分析級)和十水硫酸鈉(純度 > 98%)購自 Nacalai Tesque(日本)。 購買來自 Kishida Kagaku(日本)的磷酸二氫鈉(> 99.0% 純度)和來自 Kanto Kagaku(日本)的磷酸氫二鈉(> 99.5% 純度)以制備磷酸鹽緩沖溶液(20 mM,pH 7.0)。 所有樣品溶液均通過 Millipore 過濾器(Milli-Q Laboratory,Nihon Millipore,Japan,電阻率 18.2 MΩ cm)用純凈水制備。
(HTA)2SO4 的制備
在循環伏安法中,我們使用二十六烷基三甲基硫酸銨 (HTA)2SO4 代替 HTAB,因為溴化物 (Br-) 會干擾伏安圖。 HTAB 溶于乙醇和 1.2 當量。 加入硫酸銀以沉淀出溴化銀晶體形式的 Br?。 通過過濾從溶液中除去溴化銀。 然后,蒸發(HTA) 2 SO 4 的乙醇溶液并將干燥的鹽溶解在甲醇中。 溶解的鹽用丙酮重結晶兩次。 過濾最終的晶體并在真空干燥器中干燥。
方法
界面張力 (γ) 測量
使用了兩種類型的界面張力計。 一種是懸滴式界面張力計(PD-X 型,配有 FAMAS 1.7.0 版軟件,日本協和界面科學公司)。 一滴樣品懸浮在 18 號不銹鋼針上。 液滴周圍的水套通過循環水浴(模型 RTE-5,Neslab,美國)恒溫在 25.0±0.1°C。 在液滴形成后超過 5 分鐘記錄所有數據。 還使用了 Du Nong 型界面張力計(Model AquaPi & EZ-Pi,Kibron,Finland)。 將該張力計放置在濕度保持較高且水溫為24°C的箱體中。 在讀數變得恒定后記錄所有數據。 這些儀器用純水校準。 所有測量均在平衡 1 小時后進行。
熒光各向異性測量 所有熒光各向異性測量均在 BEACON 2000 光譜儀 (Pan Vera) 上在 25.0±0.1 °C 下進行。 該設備配備了一個 100-W 鹵素燈作為激發源和一個裝有循環水浴以控制溫度的恒溫電池室。 羅丹明 B (RB) 被用作熒光探針 [10]。 通過分別使用 570 和 630 nm 的激發和發射波長測量熒光各向異性。 發射狹縫和激發狹縫的尺寸均為 10 nm。 RB 的濃度保持在 0.1 μM。 RB 有望在膠束的表面區域增溶并報告有關那里微觀結構變化的信息。 分子探針熒光發射的去極化程度是其在激發壽命期間的旋轉擴散的量度。 穩態各向異性 (r) 通過 Perrin 方程與探針周圍的粘度有關:
其中 r0 是在沒有旋轉自由的情況下獲得的發射各向異性的極限值,C 是熒光團激發態的平均壽命,T 是絕對溫度,k 是玻爾茲曼常數,V 是探針的有效分子體積, η 是探頭周圍的粘度。 從 Perrin 方程可以看出,較大的各向異性對應于固定溫度下更加剛性的環境。 獲得的極化值 (P) 通過以下等式轉換為 r 值:
膠束介質中探針RB的各向異性值取10次讀數的平均值。
DLS
對于動態光散射 (DLS) 測量,使用了高性能粒度儀(HPPS 型,馬爾文,英國)。 激發源是 633 nm 的 He-Ne 激光。 散射角選擇為 173°,以減少多次散射。 每次測量都使用光程為 1 厘米的一次性塑料比色皿。 溫度保持在25.00±0.01℃。 所有數據均在試管設置后 10 分鐘記錄,并作為十次測量的積云。 膠束值的流體動力學半徑(RH)取三個讀數的平均值。
循環伏安法測量
在膠束溶液中研究了 I2/I? 的電極反應。 鉑圓盤電極(BAS,φ=1.6 mm)作為工作電極,銀-氯化銀電極作為參比電極,鉑絲作為對電極。 每次掃描均在工作電極用鋁粉(0.3 μm)拋光并用純水沖洗后進行。 所有樣品溶液都含有 0.49 M 硫酸鈉和 0.01 M 硫酸作為支持電解質。 使用微分恒電位儀(型號 HECS-310B,Huso,日本)。 碘化鈉的濃度恒定在 0.5 mM。 每次掃描在 10 mV s-1 下進行。 記錄含有 hp-β-CD 的碘化鈉溶液在不存在和存在 10 分鐘氬氣通氣情況下的循環伏安圖 (CV)。 未觀察到溶解氧對 CV 的影響(圖中未顯示)。 因此,所有 CV 均在沒有氬氣曝氣預處理的情況下進行。